#rezumat
Explore tagged Tumblr posts
loredanaadrianam · 9 months ago
Text
Cărțile citite în aprilie 2024
În urma unei mici intervenții chirurgicale, primele două săptămâni din aprilie le-am petrecut în concediu medical, așa că am avut timp berechet pentru lectură, pentru relaxare, pentru aer liber. Nici nu e de mirare că am citit mult și că m-am îndreptat spre ce mi-a făcut mai tare cu ochiul, fiindcă am vrut să mă bucur cu adevărat de timpul meu liber. Am numărat opt titluri terminate cu succes în…
Tumblr media
View On WordPress
0 notes
bmhasdeu · 2 years ago
Text
Pacienta tăcută de Alex Michaelides
Pe parcursul vieții, omul, prin ceea ce simte și face, de cele mai multe ori se convinge de faptul că trecutul pe care l-a trăit e cel care îi coordonează prezentul, care, la rândul său, e una din condițiile viitorului. Odată ce omul nu vrea sau nu poate lăsa trăirile negative în ceea ce a fost, ele vor deveni un manipulator ale celor simțite și făcute acum. Automat dispare siguranța a ceea ce va…
Tumblr media
View On WordPress
0 notes
valentin10 · 2 months ago
Text
REZUMAT | Gloria Buzău - Petrolul 0-1 | Etapa 16, SuperLiga, 2024 - 2025
youtube
View On WordPress
0 notes
dianapopescu · 2 years ago
Photo
Tumblr media
Friedrich Nietzsche: Așa grăit-a Zarathustra
Așa grăit-a Zarathustra  a lui Friedrich Nietzsche este una dintre cele mai stranii cărți din tradiția filosofică occidentală, care relatează despre faptele și cuvintele lui Zarathustra în stilul reminiscent al evangheliilor din Biblie și este plină de aluzii biblice, dar condamnă, totodată, creștinismul și ia în ras ideea de sfântă scriptură sau persoană sfântă. Zarathustra este, esențial, un om care laudă râsul și este capabil să râdă chiar de el însuși. https://www.diane.ro/2023/03/Nietzsche-asa-grait-a-zarathustra.html
0 notes
officialromaniantranslatiuni · 11 months ago
Text
nu am mai citit de mult recenzii de carti, dar oare au invatat gagicile din comunitate ca o recenzie nu inseamna doar sa povestesti ce se intampla (rezumat)...
8 notes · View notes
Text
Activitatea ingavirinului asupra virusurilor respiratorii umane în experimente in vivo
Citeste articolul pe https://consultatiiladomiciliu.ro/activitatea-ingavirinului-asupra-virusurilor-respiratorii-umane-in-experimente-in-vivo/
Activitatea ingavirinului asupra virusurilor respiratorii umane în experimente in vivo
Am mai scris despre Arbidol si Ingavirin, doua antivirale rusesti (descoperite si produse), fara licenta in alte state care emit astfel de licente, se pot cumpara din statele aflate in sfera de influienta a Rusiei. Profilul lor de siguranta pare a fi mai bun decat al antiviralelor produse de americani si europeni, desi studiile nu sunt cunoscute a fi la fel de riguroase. Din pacate nu putem face o comparatie pertinenta, asa ca luam datele asa cum sunt, tinand cont ca si in Rusia medicii s-au facut medici ca sa faca bine, si de faptul ca si in America, se castiga bani seriosi din dezvoltarea chimicalelor.
STUDIU Activitatea ingavirinului asupra virusurilor respiratorii umane în experimente in vivo
Vladimir V. Zarubaev  1,*,
Angelica V. Garshinina  1,
Nelly A. Kalinina  1,
Anna A. Shtro 1,
Svetlana V. Belyaevskaya 1,
Alexander V. Slita 1,
Vladimir E. Nebolsin 2 and
Oleg I. Kiselev 1
1Influenza Research Institute, 15/17 prof. Popova str., St. Petersburg 197376, Russia
2ValentaPharm, Ltd., 18 block 2, Gen. Dorokhova str., Moscow 119530, Russia*
Author to whom correspondence should be addressed.
Pharmaceuticals 2011, 4(12), 1518-1534; https://doi.org/10.3390/ph4121518
Submission received: 31 August 2011 / Revised: 16 November 2011 / Accepted: 18 November 2011 / Published: 25 November 2011
(This article belongs to the Special Issue Antivirals)
Rezumat
Infecțiile virale respiratorii constituie cel mai frecvent motiv de consultație medicală în lume. Ele pot fi asociate cu o gamă largă de manifestări clinice, de la infecții autolimitate ale tractului respirator superior până la afecțiuni mai devastatoare, cum ar fi pneumonia. În special, în cazurile grave, gripa A duce la pneumonie, care este fatală în special la pacienții cu boli cardiopulmonare, obezitate, copii mici și vârstnici. În studiul de față, arătăm un efect protector al compusului cu greutate moleculară mică Ingavirina (acid 6-[2-(1H-imidazol-4-il)etilamino]-5-oxohexanoic) împotriva virusului gripal A (H1N1), uman virusul parainfluenza și infecțiile cu adenovirus uman la animale. Mortalitatea, pierderea în greutate, titrul infecțios al virusului în țesuturi și morfologia țesuturilor au fost monitorizate în loturile experimentale de animale. Acțiunea protectoare a ingavirinei a fost observată ca o reducere a titrului infecțios al virusului în țesutul pulmonar, prelungirea vieții animalelor infectate, normalizarea dinamicii greutății pe parcursul bolii, scăderea mortalității animalelor tratate în comparație cu un controlul placebo și normalizarea structurii țesuturilor. În cazul infecției cu virusul gripal, activitatea protectoare a Ingavirinei a fost similară cu cea a compusului de referință Tamiflu. Pe baza rezultatelor obținute, ingavirina trebuie considerată o parte importantă a profilaxiei și terapiei antivirale.
Cuvinte cheie: gripă; virus paragripal; adenovirus; pandemic; Ingavirina; antiviral; model animal
1. Introducere Infecțiile virale respiratorii constituie cel mai frecvent motiv de consultație medicală în lume. Ele pot fi asociate cu o gamă largă de manifestări clinice, de la infecții autolimitate ale tractului respirator superior până la afecțiuni mai devastatoare, cum ar fi pneumonia. Prin urmare, prevenirea și controlul acestor infecții rămân obiective clinice majore. În prezent, există aproximativ 200 de viruși respiratori cunoscuți care pot fi grupați într-o familie de virusuri ADN (Adenoviridae) și patru familii de virusuri ARN (Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, Picornaviridae și Coronaviridae).
Virusul gripal A (IAV) este un agent extrem de infecțios care provoacă boli pulmonare acute. Focare de infecții cu virus gripal foarte patogen și apariția în 2009 a unei noi IAV pandemice au declanșat un reînnoit interes pentru cercetarea gripei. În mai 2010, peste 214 de țări și teritorii sau comunități de peste mări au raportat cazuri confirmate de laborator de IAV H1N1 2009, inclusiv peste 18.097 de decese [1]. Medicamentele antivirale ocupă o nișă importantă în managementul acestei boli [2,3]. Acestea vizează componente specifice virusului și sunt un tratament eficient atunci când sunt administrate în stadiul incipient al infecției sau imediat după expunerea la virus [3].
Două clase principale de medicamente antigripală sunt acceptate în prezent pentru chimioterapia IAV. Derivații adamantanului (amantadină și rimantadină) vizează canalul ionic M2 al IAV și nu sunt eficienți împotriva virusului gripal B [4]. Mai mult, apariția rapidă a rezistenței la medicamente în rândul virusurilor gripale de la mijlocul anilor 1990 a compromis mult eficacitatea acestor compuși [5]. Toți virusurile pandemice H1N1 testate până acum par, de asemenea, rezistente la medicamente [6].
Inhibitorii neuraminidazei (NAIs, oseltamivir, zanamivir și peramivir) au un spectru mai larg de activitate care include atât virusurile gripale A cât și virusurile B [7]. Cu toate acestea, din 2007 s-au observat apariția și transmiterea rapidă a virusurilor rezistente la medicamente [5,8,9]. Mai multe tulpini rezistente la NAI au fost, de asemenea, izolate de virusul pandemic H1N1 [10]. Există, prin urmare, o nevoie atât pentru identificarea de antivirale noi și eficiente, cât și pentru monitorizarea susceptibilității virusurilor circulante la compușii antivirali utilizați în clinici.
Paramixovirusurile includ virusuri importante asociate cu infecțiile tractului respirator superior și inferior la om. Printre acestea, trebuie remarcate virusul respirator respirator uman sincicial (RSV) și virusurile paragripale umane (HPIV).
RSV este o cauză majoră a bolii tractului respirator inferior la copiii prematuri (≤ 35 de luni de gestație), sugarii cu vârsta sub 6 luni și subiecții vârstnici instituționalizați. Rezultatul infecției cu RSV implică de obicei infecții ușoare ale tractului respirator superior; totuși, afecțiuni mai severe, cum ar fi pneumonia și bronșiolita, apar la 25-40% dintre copii. Aproximativ 1% dintre sugarii infectați cu RSV necesită spitalizare [11,12].
Au fost descrise patru serotipuri distincte de virusuri paragripale umane [13]. Acești virusuri pot provoca boli ale tractului respirator superior la indivizi de toate grupele de vârstă, deși copiii mici între 6 luni și 3 ani prezintă boli mai severe [13].
Adenovirusurile (AdV) sunt viruși ADN-genom fără anvelopă. În ciuda tropismului multiorganic, unele tipuri de AdV au un tropism preferențial pentru tractul respirator și pot provoca o gamă largă de simptome respiratorii, inclusiv coriza, faringita, amigdalita, bronșita și pneumonia. În general, infecțiile cu AdV sunt ușoare sau autolimitate și se rezolvă în două săptămâni fără complicații pe termen lung. Cu toate acestea, acești virusuri constituie o cauză importantă de mortalitate și morbiditate la pacienții imunocompromiși, inclusiv nou-născuții și primitorii de transplant de măduvă osoasă [11].
Mai mulți compuși pot fi utilizați pentru tratamentul infecției cu RSV, AdV și HPIV. Ribavirina inhibă replicarea virală prin mai multe mecanisme, inclusiv inhibarea polimerazei virale, inhibarea formării capacului 5′ a ARNm și inhibarea IMP dehidrogenazei conducând la o scădere a concentrațiilor intracelulare de GTP [14]. Nu există agenți terapeutici aprobați împotriva infecțiilor cu AdV. Cu toate acestea, unele antivirale cu spectru larg, cum ar fi ribavirina și analogul nucleozidic cidofoir, au fost utilizate în tratamentul infecțiilor severe cu Ad la gazdele imunodeprimate [11]. În plus, în acest scop au fost utilizați inhibitori de fuziune, oligonucleoide antisens și steroizi, niciunul dintre ei nu a fost aprobat pentru aplicare clinică.
Anterior, compusul cu greutate moleculară mică Ingavirina [6-[2-(1H-imidazol-4-il)etilamino]-5-oxohexanoic acid, cunoscut anterior și sub numele de Ingamine] s-a dovedit a avea activitate antigripală împotriva virusurilor gripale A(H3N2), A(H5N1) și B într-un model animal [15,16] și împotriva tulpinilor pandemice ale virusului gripal A/California/04/2009 și A/California/07/2009 [17–19]. În experimentele cu IAV H1N1, ingavirina a scăzut efectul citopatogen indus de virus în cultura celulară cu 50 până la 79% în comparație cu celulele martor. Șoarecii infectați cu IAV H3N2 sau H1N1 (2009) și tratați cu Ingavirină au demonstrat o mortalitate mai scăzută (aproximativ 40%) și o durată medie de viață crescută (aproximativ 4 zile) în comparație cu animalele tratate cu placebo. Luate împreună, aceste date sugerează că Ingavirina este un instrument prospectiv pentru tratamentul infecțiilor cu IAV, în special cele cauzate de virusurile pandemice. Mai mult, ingavirina a demonstrat activitate în experimente in vitro și in vivo împotriva adenovirusului uman și a virusului paragripal [20,21]. Cu toate acestea, mecanismul exact al eficacității sale clinice este departe de a fi înțeles complet.
Aici rezumăm rezultatele studiilor privind activitatea protectoare a Ingavirinei folosind modele de pneumonie gripală letală cauzată de virusul gripal pandemic A(H1N1)2009, pneumonie ușoară cauzată de HPIV și infecție diseminată indusă de adenovirus și prezentăm noi date despre aceasta. activitate antivirală privind virusurile respiratorii umane. Pe baza acestor rezultate se pot face concluzii cu privire la gama sa de activitate și aplicarea ulterioară împotriva bolilor specifice.
2. Materiale și Metode 2.1. Compuși Ingavirina (acid 6-[2-(1H-imidazol-4-il)etilamino]-5-oxohexanoic, Figura 1) a fost furnizată ca substanță pură de către producător (Valenta Pharmaceuticals, Moscova, Rusia). Tamiflu (fosfat de oseltamivir, LaRoche, Elveția), 6-azacitidina (Institutul de Biologie Moleculară și Genetică, Kiev, Ucraina) și ribavirina (ICN Biochemicals, SUA) au fost utilizate în experimente ca medicamente de referință.
Structura INGAVIRIN, un compus asemanator cu Arbidol
2.2. Viruși Virusul gripal A/California/07/09 (H1N1) a fost obținut din colecția de viruși de la Institutul de Cercetare a Gripei. Înainte de experimente, virusul a fost adaptat la șoareci prin trei pasaje în serie în țesutul pulmonar al șoarecilor, urmate de o trecere ulterioară prin cavitatea alantoică a embrionilor de pui de 10-12 zile și o trecere finală prin șoareci [22]. Omogenatul pulmonar în nouă volume de soluție salină sterilă tamponată cu fosfat a fost utilizat ca material infectant în experimente ulterioare.
Virusul paragripal uman (hPIV) de tip 3 (tulpina HA1) și adenovirusul uman (AdV) de tip 5 au fost obținute din colecția de viruși de la Institutul de Cercetare a Gripei și propagate în MA-104 (ATCC CRL-2378) sau HEp-2 (ATCC). celulele CCL-23), în mod corespunzător, la 36 °C în 5% CO2.
2.3. Animale În experimentele cu virusul gripal au fost utilizați femele de șoareci Balb/c, de 16–20 de grame, de la ferma de creștere a animalelor de laborator Rappolovo. Hamsterii sirieni crescuți în Institutul de Cercetare a Gripei au fost utilizați pentru experimente cu hPIV și AdV. Experimentele pe animale au fost planificate în conformitate cu principiile îngrijirii animalelor de laborator (Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, National Academy Press: Washington, DC, USA, 1996) și aprobate de Comitetul de etică instituțională.
2.4. Titrarea virusului Înainte de studiile activității protectoare a ingavirinei la animale, virusul gripal adaptat la șoarece a fost titrat pentru efectul său letal. În acest scop, șoarecii (10 în fiecare grup experimental) au fost inoculați intranazal sub anestezie cu 50 μL de diluții zecimale în serie (10-1 până la 10-5) de omogenat pulmonar al șoarecilor infectați cu virus. Diluția care a provocat moartea a 50% dintre animale în 14 zile după infecție (DL50) a fost calculată așa cum a fost descris anterior [23] și utilizată pentru experimentele ulterioare.
2.5. Activitatea protectoare a INGAVIRIN Pentru evaluarea activității antigripală a Ingavirinei in vivo, șoarecii au fost infectați cu cinci LD50 (20 de șoareci) sau un LD50 (30 de șoareci) din virusul titrat anterior (vezi secțiunea „Titrarea virusului”). Ingavirina a fost diluată în ser fiziologic la doze de 15, 20 sau 30 mg/kg greutate corporală/zi și aplicată oral prin gavaj o dată pe zi în ziua unu, două, trei, patru și cinci după infecție (p.i.). Pentru a studia efectul programului de tratament asupra activității de protecție, grupuri separate de animale au fost tratate de două ori (zilele 1 și 2 p.i.) cu 30 mg/kg ingavirină urmate de trei doze de 15 mg/kg (zilele 3, 4 și 5 p.i.) . Cantitatea totală de ingavirină primită de animalele din acest grup a fost egală cu cea din grupul de 20 mg/kg. Medicamentul de referință Tamiflu (doza finală 20 mg/kg greutate corporală) a fost dizolvat în soluție salină și aplicat la 20 de șoareci (cinci DL50) sau 30 de șoareci (o DL50) pe cale orală într-un volum de 200 μL. Animalele martor au fost tratate cu ser fiziologic steril.
Animalele din toate loturile experimentale au fost cântărite zilnic. S-a calculat mortalitatea la fiecare grup de animale. Fiecare grup a fost verificat zilnic pentru animale moarte timp de două săptămâni după inoculare. Pe baza datelor primite, s-au calculat procentul de mortalitate, indicele de protecție (raportul mortalității în grupul de control față de mortalitatea din grupul experimental) și ziua medie a decesului (MDD).
În ziua a treia p.i., zece șoareci din fiecare grup infectat cu un DL50 al virusului au fost sacrificați, pieptul lor deschis și plămânii izolați. Cinci plămâni au fost utilizați pentru titrarea virusului și alți cinci pentru examinarea histologică (vezi secțiunea „Examinare histologică”).
Pentru a determina titrul infecțios al virusului în țesutul pulmonar, plămânii au fost omogenizați în zece volume de soluție salină sterilă tamponată cu fosfat. S-au preparat diluții în serie (10-1-10-7) din fiecare omogenat. Celulele MDCK crescute în plăci cu 96 de godeuri au fost inoculate cu 0,2 mL din fiecare diluție și incubate la 36 °C timp de 48 de ore în 5% CO2. După incubare, supernatantul a fost recoltat și testat pentru prezența virusului gripal prin amestecarea fluidului în godeuri cu fund rotund cu volume egale de suspensie 1% de eritrocite de pui în ser fiziologic. Titrul de virus în plămâni a fost considerat diluția finală atunci când a provocat o reacție de hemaglutinare pozitivă în godeu, iar titrul de virus este exprimat în log10EID50/20 mg țesut. Activitatea compușilor a fost evaluată prin capacitatea lor de a scădea titrul infecțios al virusului în țesutul pulmonar.
Pentru studiul activității anti-hPIV a ingavirinei, hamsterii sirieni în vârstă de patru până la cinci săptămâni au fost infectați cu 0,05 mL (104 TCID50) de virus parainfluenza uman (hPIV) intranazal, așa cum este descris în [24]. Ingavirina a fost utilizată așa cum este descris mai sus. În ziua 3 și 7 p.i. animalele au fost sacrificate, iar plămânii lor au fost utilizați pentru titrarea virusului în celulele MA-104 și, respectiv, analiza histologică (vezi mai jos). Titrul virusului a fost determinat prin ELISA utilizând anticorpi monoclonali anti-hPIV (PPDP Ltd., St. Petersburg, Rusia).
Activitatea anti-AdV a compusului a fost testată așa cum s-a descris anterior [25].
2.6. Examenul histologic Plămânii animalelor au fost fixați în formaldehidă tamponată cu PBS 4%, deshidratați în etanol gradat și încorporați în parafină. Secțiuni de patru micrometri au fost tăiate și colorate cu hemotoxilină-eozină.
În cazul infecției gripale, celulele epiteliului bronșic au fost împărțite în patru categorii distincte morfologic: (i) celule intacte fără semne de replicare a virusului; (ii) celule cu stadii inițiale de formare a incluziunilor specifice virusului; (iii) celule cu incluziuni avansate de virus; și (iv) celule moarte care arătau ca goluri între alte celule cu denudare a membranei bazale. Au fost calculate ratele fiecărei categorii de celule dintre celulele stratului epitelial bronșic. Valorile morfometrice au fost evaluate de doi observatori independenți.
3. Rezultate 3.1. Infecția gripală Inocularea animalelor cu un virus gripal adaptat a dus la dezvoltarea pneumoniei gripale. Semnele clinice ale bolii au fost tipice pentru infecția gripală severă și au inclus ataxie, tremor, respirație scurtă, precum și scăderea consumului de apă și alimente care duce la pierderea în greutate. În ziua 15 p.i. S-a observat moartea a 55–90% dintre animalele infectate, în funcție de doza infectantă a virusului.
Activitatea protectoare a ingavirinei a fost evaluată atunci când este aplicată o dată pe zi timp de cinci zile după inocularea virusului. Nu s-a observat nicio mortalitate nespecifică în grupurile de control de animale neinfectate tratate cu soluție salină și șoareci neinfectați tratați cu Ingavirin. Aplicarea ingavirinei a dus la o scădere a mortalității (la 18–67%), precum și la o creștere a zilei medii de deces (1,2–4,1 zile) comparativ cu animalele martor (în funcție de doza de virus și compus). Șoarecii tratați cu compusul de referință Tamiflu au demonstrat, de asemenea, o mortalitate semnificativ mai scăzută (indicele de protecție 80%) și prelungirea duratei medii de viață (până la 5,4 zile) în comparație cu valorile martor (Tabelul 1). În plus, tratamentul animalelor cu Ingavirina, în mod similar cu compusul de referință Tamiflu, a dus la normalizarea dinamicii greutății animalelor (Figura 2), conducând la profiluri de greutate similare în comparație cu animalele neinfectate.
Figura 2. Dinamica greutății corporale a șoarecilor în cursul pneumoniei cauzate de virusul gripal A/California/7/09 (H1N1)v. Tabelul 1. Activitatea protectoare a Ingavirinei împotriva gripei A (H1N1) 2009. Valorile p < 0,05 sunt indicate cu caractere aldine.
După cum se arată prin titrarea virusului din plămânii șoarecilor, în ziua a treia p.i. virusul s-a replicat în țesutul pulmonar până la 105,1 EID50/20 mg țesut. Aplicarea compusului de referință Tamiflu a scăzut titrul viral de aproximativ 320 de ori (102,6 EID50/20 mg țesut). Tratamentul animalelor cu Ingavirina a dus, de asemenea, la o scădere a titrurilor virusului (aproximativ 103,5 EID50/20 mg), care este statistic identică cu activitatea oseltamivirului (Tabelul 1).
Pentru a evalua efectul ingavirinei asupra structurii țesutului pulmonar, analiza morfologică a fost efectuată în ziua a treia p.i. Plămânii șoarecilor infectați cu virus au fost consolidați și edematoși. Toți șoarecii infectați au prezentat leziuni alveolare difuze exsudative cu edem interstițial, exsudate fibrinoase în alveolele lor, infiltrație inflamatorie, necroză epitelială bronșială și descuamare. Celulele epiteliului bronșic și bronșiolar au conținut incluziuni virale sau au fost absente cu denudarea membranei bazale [Figura 3(a)].
Figura 3. Patologii ale șoarecilor inoculați intranazal cu virusul gripal adaptat la șoarece A/California/7/09 (H1N1)v în ziua 3 p.i. (a) Plămânii unui șoarece tratat cu placebo. Suprafață mare de pneumonie cu exsudate intense în lumenul bronșic, alveolită severă neutrofilă până la histiocitară; (b) Peribronșită limfocitară ușoară cu alveolită ușoară la un șoarece tratat cu 30 mg/kg greutate corporală de ingavirină. Celulele epiteliului bronșic sunt intacte, exsudate ușoare în lumenul bronșic; (c) Peribronșită limfocitară ușoară cu alveolită la un șoarece tratat cu 20 mg/kg oseltamivir; (d) Plămânii șoarecilor intacți. Fără semne de inflamație sau distrugere celulară. Hematoxilin-eozină, ×200. Aplicarea Ingavirinei, similar cu compusul de referință Tamiflu, a dus la normalizarea structurii țesutului pulmonar, în special, la limitarea edemului și a leziunilor alveolare, scăderea cantității de reziduuri în lumenul bronșic și protecția epiteliului bronșic de moarte [Figura 3( b), Tabelul 1].
Pentru a studia mecanismul activității de protecție a ingavirinei, ne-am uitat mai atent la celulele epiteliului bronșic care sunt considerate ținte primare pentru virusul gripal. Analiza morfometrică a celulelor a arătat că aproape 100% din celulele epiteliale ale șoarecilor intacte au fost reprezentate de celule intacte.
Inocularea cu virusul gripal a condus la creșterea ratei celulelor din alte trei grupuri (adică celule cu incluziuni inițiale, incluziuni avansate și celule moarte), sugerând o acțiune citotoxică puternică a virusului. Aplicarea atât a Ingavirinei, cât și a compusului de referință oseltamivir a scăzut puternic numărul de celule moarte și a crescut rata celulelor intacte ale epiteliului bronșic. Din aceste rezultate sugerăm că acest compus este capabil să protejeze celulele împotriva daunelor induse de virus (Figura 4).
Figura 4. Activitatea citoprotectoare a ingavirinei în celulele epiteliului bronșic după infectarea cu virusul gripal adaptat la șoarece A/California/7/09 (H1N1)v (ziua 3 p.i.). 3.2. Infecția cu virusul parainfluenza Infectarea hamsterilor sirieni cu virusul parainfluenza umană (hPIV) are ca rezultat bronșită ușoară, bronșiolită și pneumonie neletale. Virusul poate fi recuperat din plămâni în ziua 3 p.i., iar afectarea specifică a țesuturilor poate fi observată în ziua 7.
După cum se arată prin titrarea virusului, aplicarea atât a ingavirinei, cât și a compusului de referință ribavirină a condus la reducerea titrului infecțios al hPIV în țesutul pulmonar. Ribavirina a demonstrat cea mai mare activitate în scăderea titrului, deși ambele doze de Ingavirina au condus, de asemenea, la o reducere semnificativă statistic (Tabelul 2).
Tabelul 2. Activitatea infecțioasă a hPIV în țesutul pulmonar al hamsterilor sirieni după aplicarea ingavirinei.
Hamsterii infectați cu hPIV nu au prezentat dovezi observabile de boală înainte de sacrificiu, dar din punct de vedere histologic a existat o producție constantă de pneumonie. Leziunile pulmonare constau din exsudate endobronșice împrăștiate compuse din celule mononucleare și polimorfonucleare, infiltrate de celule rotunde peribronșice și perivasculare și zone largi de pneumonie interstițială. Epiteliul bronșic avea un aspect specific care conținea grupuri de celule gigantice înalte care ieșeau în lumenul bronșic [Figurile 5 (a, b)]. Animalele tratate cu ingavirină și ribavirină au demonstrat o arhitectură a țesutului pulmonar aproape normal, cu puține celule infiltrante [Figurile 5 (c, d)].
Figura 5. Structura țesutului pulmonar al hamsterilor sirieni în ziua 7 după inocularea cu hPIV-3 cu (c,d) sau fără (a,b) tratament cu Ingavirină. a, c—Alveole, b, d—Epiteliu bronșic. Hematoxilină-eozină, ×100 (a), ×400 (b,c,d). 3.3. Infecția cu adenovirus uman Întrucât adenovirusurile umane nu provoacă infecții respiratorii în aer la animale, am studiat activitatea antivirală a ingavirinei folosind modelul dezvoltat anterior de infecție adenovirală diseminată a hamsterilor sirieni nou-născuți cauzată de adenovirusul uman de tip 5 [25]. Similar cu infecția cu hPIV, activitatea de protecție a fost evaluată prin titrarea virusului în organele țintă și analiza histologică a arhitecturii țesuturilor.
Infectarea subcutanată a hamsterilor sirieni nou-născuți a dus la replicarea virusului în plămânii și ficatul animalelor. Rezultatele titrarii virusului în celulele HEp-2 în ziua a treia p.i. sunt rezumate în tabelul 3.
Tabelul 3. Activitatea infecțioasă a AdV în ficat și plămâni la hamsterii sirieni după aplicarea ingavirinei.
După cum se poate observa, tratamentul infecției cu AdV cu compusul de referință 6-AC a dus la restricția replicării virusului atât în ​​ficat, cât și în plămânii animalelor, ceea ce este în acord cu rezultatele noastre anterioare [25]. Aplicarea ingavirinei a condus la o reducere moderată (aproximativ o zecimală), dar semnificativă statistic, a titrului virusului atât în ​​ficat, cât și în plămânii animalelor.
Investigarea histologică a ficatului animalelor infectate a evidențiat focare de necroză. Din punct de vedere morfologic, au fost zonele de distrugere a parenchimului cauzate de leziunea specifică a hepatocitelor și distrugerea nespecifică a țesutului din cauza unei reacții inflamatorii locale. Leziunile specifice celulelor hepatice s-au manifestat în creșterea nucleelor ​​celulare, deformarea acestora și apariția corpurilor de incluziune nucleară eozinofili și bazofili specifici virusului. Alterările reactive ale țesutului s-au datorat distrugerii inflamatorii a hepatocitelor și infiltrației tisulare cu leucocite. Animalele infectate tratate cu ingavirina au avut focare mai mici de inflamație și hepatocite cu aspect intacte, spre deosebire de hepatocitele foarte vacuolizate la animalele de control (Figura 6).
Figura 6. Patologia hepatitei induse de AdV în ficatul hamsterilor sirieni nou-născuți în ziua 3 p.i. Focalizare mare de inflamație cu numeroase celule infectate cu AdV (vârfuri de săgeată), vacuolizarea hepatocitelor (a, b) la animalele de control, focar mic de inflamație și parenchim intact (c) la animalele tratate cu Ingavirina. Hematoxilin-eozină, ×400. Pentru a cuantifica efectul protector al ingavirinei, am măsurat dimensiunea focarelor de necroză în ficat și am numărat numărul de celule infectate cu AdV în fiecare focar (Tabelul 4).
Tabelul 4. Efectul ingavirinei asupra evoluției hepatitei induse de AdV la hamsterii sirieni nou-născuți. Masă După cum arată analiza morfometrică, aplicarea Ingavirinei a scăzut dimensiunea medie a focarelor de inflamație indusă de virus și a redus puternic numărul de celule infectate. Interesant, efectul unei doze mai mari de medicament (45 mg/kg/zi) a fost mai mic decât cel al dozei mai mici (30 mg/kg/zi), sugerând un mod specific de activitate a acestui compus.
4. Discuție În studiul de față, am arătat un efect protector al compusului cu greutate moleculară mică Ingavirina împotriva infecției letale cu virusul gripal cauzat de virusul gripal pandemic A (H1N1) la șoareci și a patologiilor nefatale ale hamsterilor sirieni cauzate de virusul paragripal uman și uman. adenovirus. Au fost investigate efectele dozei asupra activității de protecție a compusului și a replicării virusului în țesut. Acțiunea protectoare a ingavirinei a fost demonstrată ca o reducere a titrului infecțios al virusului în țesutul pulmonar, prelungirea vieții animalelor infectate, normalizarea dinamicii greutății în cursul bolii, scăderea mortalității animalelor tratate în comparație cu un control placebo și normalizarea structurii țesutului pulmonar și hepatic. În cazul infecției gripale, activitatea protectoare a Ingavirinei a apărut similară cu cea a compusului de referință Tamiflu.
În experimentele noastre, Ingavirina a demonstrat activitatea de protecție împotriva pneumoniei gripale letale la șoareci. La unele doze, efectul protector a fost egal cu activitatea oseltamivirului, care este un medicament acceptat la nivel internațional, dovedit a fi eficient împotriva acestui IAV. În general, rezultatele noastre sunt în acord cu datele obținute anterior [15-19] în care s-a demonstrat că Ingavirina are un efect protector împotriva virusurilor gripale A și B.
Krug și Aramini [26] au sugerat că două domenii posibile ale nucleoproteinei virusului gripal (NP), unul situat într-o buclă de coadă și altul într-un canal de legare a ARN găsit între domeniile capului și corpului la suprafața exterioară a trimerului NP, reprezintă potențialele ținte antivirale. Domeniul localizat în bucla de coadă este crucial pentru oligomerizarea NP care este, la rândul său, necesară pentru transcripția și replicarea eficientă a genomului viral. Prin urmare, inactivarea acestui domeniu ar putea fi eficientă pentru suprimarea replicării virusului. Într-adevăr, unele experimente sugerează că Ingavirina vizează nucleoproteina gripei (NP). Într-un studiu recent [27] s-a demonstrat că ingavirina interacționează cu virusul gripal NP, prevenind astfel oligomerizarea NP necesară pentru replicarea virală. În al treilea studiu, mai mulți analogi ai micalamidei A au fost identificați ca inhibitori direcționați de NP ai replicării virusului gripal [28]. S-a demonstrat că acești compuși se leagă de coada N-terminală de 13 aminoacizi, care mediază transportul nuclear al NP și legarea acestuia de ARN viral. Mai mult, Kao et al. [29] au raportat identificarea unui compus cu molecule mici, nucleozina, care declanșează agregarea NP și inhibă acumularea sa nucleară. Nucleozina a împiedicat replicarea virusului gripal A in vitro cu o concentrație nanomolară și a protejat șoarecii provocați cu doze letale de gripă aviară A H5N1. Aceste date sugerează că legarea compusului la această țintă poate inhiba replicarea virală prin inhibarea funcțiilor NP. Nici analogii micalamidei A și nici nucleozina nu demonstrează nicio asemănare structurală cu Ingavirina, ceea ce ne face să presupunem că alte domenii ale NP virale pot fi implicate în interacțiunea cu Ingavirina.
Dintr-o altă parte, s-a demonstrat că aplicarea Ingavirinei are ca rezultat modificarea morfologiei virionilor detectați în lavajul bronhoalveolar al șoarecilor infectați [30]. Animalele de control au produs în cea mai mare parte virioni sferici, în timp ce la animalele tratate cu ingavirină s-au format probabil particule filamentoase cu infectivitate redusă. Aceste rezultate sugerează că ingavirina ar putea interfera cu procesul de asamblare și/sau înmugurire a virusului, conducând la reducerea încărcăturii virale.
În studiul nostru, activitatea oseltamivirului a apărut mai mică decât în ​​experimentele similare ale lui Smee și colab. [31]. Acest lucru ar putea fi legat de o doză mai mare de virus, virus diferit utilizat în experimentele noastre și program diferit de aplicare a medicamentului (o dată pe zi în loc de două ori pe zi în [31]). În același timp, efectele antivirale directe ale ingavirinei detectat printr-o scădere a titrului infecțios al virusului în țesutul pulmonar a apărut de zece ori mai puțin decât cel al Tamiflu, în ciuda nivelului similar de protecție împotriva letalității (Tabelul 1). Această contradicție ar putea indica faptul că alte mecanisme, în plus față de o activitate antivirală directă, ar putea contribui la protecția rezultată a animalelor împotriva letalității cauzate de IAV.
Infecția cu virusul gripal variază în severitate de la o infecție asimptomatică la o boală gravă cu caracteristici sistemice. Gripa severă se manifestă prin reacții specifice virusului cu dezvoltarea ulterioară a proceselor reactive. Aceste procese sunt induse de virusul care se replica în celulele țintă și realizate prin mecanisme gazdă, inclusiv reacții imune, stres oxidativ și alte procese de radicali liberi, activitate proteolitică îmbunătățită, creșterea bruscă a nivelului de citokine proinflamatorii și multe altele [32].
În clinici, unul dintre principalele motive pentru pneumonia gripală severă și complicată, inclusiv cazurile fatale, este tratamentul tardiv și/sau inadecvat [33,34]. În aceste cazuri, evoluția bolii este determinată de mecanisme care sunt inițial induse de virus, dar în cele din urmă realizate de gazdă, inclusiv, în special, inflamația severă („furtuna de citokine”) [35-37]. Experimentele folosind șoareci knockout infectați cu virusul gripal cu gene inactivate în căile inflamatorii, cum ar fi interleukina 1α/β, receptorii de chemokine macrofagice CCR5 și CCR2, ciclooxigenaza 1 și 2 [38–40] au demonstrat clar că, în plus față de nivelul de virus ‘ replicare în plămâni, intensitatea reacțiilor gazdei contribuie în mod semnificativ la cursul și rezultatul bolii. Prin urmare, în cazurile severe de gripă, atât medicamentele antivirale directe, cât și cele patogenetice ar trebui incluse în terapia complexă, în special acei compuși care limitează furtuna de citokine, edemele pulmonare, inflamația și afectarea țesuturilor [41]. De exemplu, recent a fost demonstrată activitatea de protecție ridicată a 7-hidroxicumarinei (7-HC) [42]. S-a demonstrat că 7-HC posedă proprietăți antivirale datorită capacității sale de a scădea nivelul de citokine proinflamatorii la animalele infectate, atenuând astfel infecția gripală severă. În același timp, 7-HC nu a redus nivelul de replicare a virusului în testele de reducere a plăcii, ceea ce sugerează că activitatea sa de protecție, inclusiv scăderea replicării virusului în plămânii de șoarece, este de natură complexă și poate fi mediată de semnalizarea celulară și căile reactive. S-ar putea sugera că, pe lângă capacitatea de a scădea în mod direct nivelul de replicare a virusului în plămâni (Tabelul 1), ingavirina ar putea avea proprietăți similare pe baza rezultatelor examinărilor de morfologie pulmonară la șoarece, care arată că tratamentul cu Ingavirina a redus semnificativ gradul de leziuni tisulare, inflamație și edem (Figura 3, Tabelul 1). Studii suplimentare asupra efectelor ingavirinei asupra diferitelor căi patogenetice ar fi utile pentru înțelegerea mecanismului său de activitate. Ingavirina trebuie considerată o parte importantă a profilaxiei și terapiei antigripală, în special în cazurile severe ale bolii.
În experimentele noastre, Ingavirina a demonstrat, de asemenea, activitate anti-virală împotriva altor două viruși utilizați, hPIV și AdV [19,20]. Deoarece acești viruși sunt filogenetic distincti unul de celălalt și nu există componente virale comune tuturor celor trei viruși utilizați în studiu, se poate concluziona că acest medicament vizează componentele și căile responsabile pentru dezvoltarea patologiei celulare și tisulare în timpul infecției virale. Într-adevăr, în toate cele trei cazuri a demonstrat un grad ridicat de citoprotecție și capacitatea de a normaliza arhitectura țesutului. Aplicarea sa a prevenit moartea celulelor epiteliului bronșic infectate cu virusul gripal, citopatologia indusă de hPIV în plămâni și vacuolizarea indusă de virus a hepatocitelor în timpul infecției cu AdV la hamsteri. Mai mult, în experimentele noastre anterioare [21] am demonstrat capacitatea ingavirinei de a preveni deteriorarea celulară indusă de AdV în cultură. În ciuda formării de incluziuni specifice virusului intranuclear tipic, celulele tratate cu Ingavirina nu au dezvoltat vacuole în citoplasmă și alte semne morfologice de citopatogenitate. Prin urmare, în plus față de alte mecanisme(e) de acțiune antiviră, Ingavirina posedă o activitate citoprotectoare care previne distrugerea celulelor infectate și menține funcția organului țintă minimizând astfel deteriorarea tisulară indusă de virus și simptomele de toxicitate în cursul bolii.
Trebuie remarcat faptul că nu a fost observată nicio toxicitate a ingavirinei la doze de până la doze de 3000 mg/kg. De asemenea, nu au fost observate semne de embriotoxicitate în studiile anterioare [43]. Pentru comparație, DL50 pentru Tamiflu a fost estimată la 100–250 mg/kg, în funcție de calea și programul de inoculare și speciile de animale [44]. Mai mult, în studiile clinice, ingavirina nu a demonstrat efecte secundare atunci când a fost aplicată la pacienții infectați cu gripă [45]. Prin urmare, ingavirina poate fi considerată un compus netoxic cu risc scăzut de supradozaj.
5. Concluzii Luate împreună, datele noastre sugerează că Ingavirina este un antiviral netoxic cu spectru larg, cu mecanism complex de acțiune. Studiul suplimentar al mecanismului fin al activității sale protectoare ar permite optimizarea structurii medicamentului și probabil dezvoltarea unei noi clase de compuși pentru profilaxia și tratamentul infecțiilor virale.
Mulțumiri Mulțumim Tatianei D. Smirnova de la Institutul de Cercetare a Gripei pentru furnizarea de linii celulare. De asemenea, mulțumim Lidiya Nosach de la Institutul de Microbiologie și Virologie, Kiev, Ucraina, și Innei Alexeeva de la Institutul de Biologie Moleculară și Genetică, Kiev, Ucraina, pentru că au furnizat cu amabilitate 6-azacitidină pentru experimente.
Conflict de interese Nu a fost detectat niciun conflict de interese în legătură cu această publicație.
Referințe și note
World Health Organization (WHO), CSR, Disease Outbreak News [abbreviated and edited]. Available online: http://www.who.int/csr/don/2010_05_21/en/index.html (accessed on 11 November 2011).
Moscona, A. Oseltamivir resistance—Disabling our influenza defenses. N. Engl. J. Med. 2005, 353, 2633–2636. [Google Scholar]
Moscona, A. Medical management of influenza infection. Annu. Rev. Med. 2008, 59, 397–413. [Google Scholar]
Hayden, F.G. Combination antiviral therapy for respiratory virus infections. Antivir. Res. 1996, 29, 45–48. [Google Scholar]
CDC. Influenza activity—United States and worldwide, May 18–September 19. MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 2008, 57, 1046–1049. [Google Scholar]
Dawood, F.S.; Jain, S.; Finelli, L.; Shaw, M.W.; Lindstrom, S.; Garten, R.J.; Gubareva, L.V.; Xu, X.; Bridges, C.B.; Uyeki, T.M. Emergence of a novel swine-origin influenza A (H1N1) virus in humans. N. Engl. J. Med. 2009, 360, 2605–2615. [Google Scholar]
Hayden, F. Developing new antiviral agents for influenza treatment: What does the future hold? Clin. Infect. Dis. 2009, 1, 3–13. [Google Scholar]
Hauge, S.H.; Dudman, S.; Borgen, K.; Lackenby, A.; Hungnes, O. Oseltamivir-resistant influenza viruses A (H1N1), Norway. Emerg. Infect. Dis. 2007, 15, 155–162. [Google Scholar]
Dharan, N.J.; Gubareva, L.V.; Meyer, J.J.; Okomo-Adhiambo, M.; McClinton, R.C.; Marshall, S.A.; St, G.K.; Epperson, S.; Brammer, L.; Klimov, A.I.; et al. Infections with oseltamivir-resistant influenza A (H1N1) virus in the United States. J. Am. Med. Assoc. 2009, 301, 1034–1041. [Google Scholar]
Chan, P.A.; Connell, N.T.; Gabonay, A.M.; Westley, B.; Larkin, J.M.; Larosa, S.P.; Chapin, K.; Mermel, L. Oseltamivir resistant 2009–2010 pandemic influenza A (H1N1) in an immunocompromised patient. Clin. Microbiol. Infect. 2010, 16, 1576–1578. [Google Scholar]
Abed, Y.; Boivin, G. Treatment of respiratory virus infections. Antivir. Res. 2006, 70, 1–16. [Google Scholar]
Greenough, A. Respiratory syncycial virus infections: Clinical features, management and prophylaxis. Curr. Opin. Pulm. Med. 2002, 8, 214–217. [Google Scholar]
Henrickson, K.J. Parainfluenza viruses. Clin. Microbiol. Rev. 2003, 16, 242–264. [Google Scholar]
Balfour, H.H. Antiviral drugs. N. Engl. J. Med. 1999, 340, 1255–1268. [Google Scholar]
Loginova, Sia.; Borisevich, S.V.; Maksimov, V.A.; Bondarev, V.P.; Nebol’sin, V.E. Therapeutic efficacy of Ingavirin, a new domestic formulation against influenza A virus (H3N2). Antibiot. Khimioter. 2008, 53, 27–30. [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Garshinina, A.V.; Kalinina, N.A.; Shtro, A.A.; Nebol’sin, V.E.; Kiselev, O.I. Antiviral activity of Ingavirin in experimental lethal influenza due to influenza virus B in albino mice. Antibiot. Khimioter. 2010, 55, 8–11. [Google Scholar]
Loginova, S.I.; Borisevich, S.V.; Lykov, M.V.; Vedenina, E.V.; Borisevich, G.V.; Bondarev, V.P.; Nebol’sin, V.E.; Chuchalin, A.G. In vitro efficacy of ingavirin against the Mexican pandemic subtype H1N1 of influenza A virus, strains A/California/04/2009 and A/California/07/2009. Antibiot. Khimioter. 2009, 54, 15–17. [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Garshinina, A.V.; Kalinina, N.A.; Shtro, A.A.; Beliaevskaia, S.V.; Nebol’sin, V.E.; Kiselev, O.I. Protective activity of Ingavirin in experimental lethal influenza due to pandemic influenza virus A (H1N1)v in albino mice. Antibiot. Khimioter. 2010, 55, 24–31, Russian. [Google Scholar]
Shishkina, L.N.; Nebolsin, V.E.; Kabanov, A.S.; Skarnovich, M.O.; Mazurkova, N.A.; Sergeev, A.A.; Serova, O.A.; Stavsky, E.A.; Drozdov, L.G. In vitro and in vivo efficacy of Ingavirin against strains of pandemic influenza virus A(H1N1/09)V. Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 2011, 93–96. [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Krivitskaia, V.Z.; Nebol’sin, V.E.; Kiselev, O.I. Experimental investigation of Ingavirin antiviral activity against human parainfluenza virus. Antibiot. Khimioter. 2010, 55, 13–6, (Russian). [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Slita, A.V.; Sirotkin, A.C.; Nebol’sin, V.E.; Kiselev, O.I. Experimental investigation of Ingavirin antiviral activity against human adenovirus. Antibiot. Khimioter. 2010, 55, 19–24, (Russian). [Google Scholar]
Narasaraju, T.; Sim, M.K.; Ng, H.H.; Phoon, M.C.; Shanker, N.; Lal, S.K.; Chow, V.T. Adaptation of human influenza H3N2 virus in a mouse pneumonitis model: Insights into viral virulence, tissue tropism and host pathogenesis. Microbes Infect. 2009, 11, 2–11. [Google Scholar]
Reed, L.J.; Muench, H. A simple method of estimating fifty percent endpoints. Am. J. Epidemiol. 1938, 27, 493–497. [Google Scholar]
Greer, C.E.; Zhou, F.; Goodsell, A.; Legg, H.S.; Tang, Z.; zur Megede, J.; Uematsu, Y.; Polo, J.M.; Vajdy, M. Long-term protection in hamsters against human parainfluenza virus type 3 following mucosal or combinations of mucosal and systemic immunizations with chimeric alphavirus-based replicon particles. Scand. J. Immunol. 2007, 66, 645–653. [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Slita, A.V.; Sukhinin, V.P.; Nosach, L.N.; Dyachenko, N.S.; Povnitsa, O.Y.; Zhovnovataya, V.L.; Alexeeva, I.V.; Palchikovskaya, L.I. Effect of 6-azacytidine on the course of experimental adenoviral infection in newborn Syrian hamsters. J. Chemother. 2007, 19, 44–51. [Google Scholar]
Krug, R.M.; Aramini, J.M. Emerging antiviral targets for influenza A virus. Trends Pharmacol. Sci. 2009, 30, 269–277. [Google Scholar]
Semenova, N.P.; Prokudina, E.N.; L’vov, D.K.; Nebolsin, V.E. Effect of the antiviral drug Ingavirin on intracellular transformations and import into the nucleus of influenza A virus nucleocapsid protein. Vopr. Virusol. 2010, 55, 17–20. [Google Scholar]
Hagiwara, K.; Kondoh, Y.; Ueda, A.; Yamada, K.; Goto, H.; Watanabe, T.; Nakata, T.; Osada, H.; Aida, Y. Discovery of novel antiviral agents directed against the influenza A virus nucleoprotein using photo-cross-linked chemical arrays. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2010, 394, 721–727. [Google Scholar]
Kao, R.Y.; Yang, D.; Lau, L.S.; Tsui, W.H.; Hu, L.; Dai, J.; Chan, M.P.; Chan, C.M.; Wang, P.; Zheng, B.J.; et al. Identification of influenza A nucleoprotein as an antiviral target. Nat. Biotechnol. 2010, 28, 600–605. [Google Scholar]
Zarubaev, V.V.; Belyaevskaya, S.V.; Sirotkin, A.C.; Anfimov, P.M.; Nebol’sin, V.E.; Kiselev, O.I.; Reikhart, D.V. Effect of Ingavirin on ultrastructure and infectivity of influenza virus in vitro and in vivo. Vopr. Virusol. 2011, 56, 21–25. [Google Scholar]
Smee, D.F.; Hurst, B.L.; Wong, M.H.; Tarbet, E.B.; Babu, Y.S.; Klumpp, K.; Morrey, J.D. Combinations of oseltamivir and peramivir for the treatment of influenza A (H1N1) virus infections in cell culture and in mice. Antivir. Res. 2010, 88, 38–44. [Google Scholar]
Zambon, M.C. Epidemiology and pathogenesis of influenza. J. Antimicrob. Chemother. 1999, 44S, 3–9. [Google Scholar]
Lapinsky, S.E. Epidemic viral pneumonia. Curr. Opin. Infect. Dis. 2010, 23, 139–144. [Google Scholar]
Rello, J.; Rodríguez, A.; Ibañez, P.; Socias, L.; Cebrian, J.; Marques, A.; Guerrero, J.; Ruiz-Santana, S.; Marquez, E.; Del Nogal-Saez, F.; et al. Intensive care adult patients with severe respiratory failure caused by Influenza A (H1N1)v in Spain. Crit. Care 2009, 13, R148:1–R148:9. [Google Scholar]
Woo, P.C.; Tung, E.T.; Chan, K.H.; Lau, C.C.; Lau, S.K.; Yuen, K.Y. Cytokine profiles induced by the novel swine-origin influenza A/H1N1 virus: Implications for treatment strategies. J. Infect. Dis. 2010, 201, 346–353. [Google Scholar]
Garigliany, M.M.; Habyarimana, A.; Lambrecht, B.; van de Paar, E.; Cornet, A.; van den Berg, T.; Desmecht, D. Influenza A strain-dependent pathogenesis in fatal H1N1 and H5N1 subtype infections of mice. Emerg. Infect. Dis. 2010, 16, 595–603. [Google Scholar]
To, K.K.; Hung, I.F.; Li, I.W.; Lee, K.L.; Koo, C.K.; Yan, W.W.; Liu, R.; Ho, K.Y.; Chu, K.H.; Watt, C.L.; et al. Delayed clearance of viral load and marked cytokine activation in severe cases of pandemic H1N1 2009 influenza virus infection. Clin. Infect. Dis. 2010, 50, 850–859. [Google Scholar]
Schmitz, N.; Kurrer, M.; Bachmann, M.F.; Kopf, M. Interleukin-1 is responsible for acute lung immunopathology but increases survival of respiratory influenza virus infection. J. Virol. 2005, 79, 6441–6448. [Google Scholar]
Dawson, T.C.; Beck, M.A.; Kuziel, W.A.; Henderson, F.; Maeda, N. Contrasting effects of CCR5 and CCR2 deficiency in the pulmonary inflammatory response to influenza A virus. Am. J. Pathol. 2000, 156, 1951–1959. [Google Scholar]
Carey, M.A.; Bradbury, J.A.; Seubert, J.M.; Langenbach, R.; Zeldin, D.C.; Germolec, D.R. Contrasting effects of cyclooxygenase-1 (COX-1) and COX-2 deficiency on the host response to influenza A viral infection. J. Immunol. 2005, 175, 6878–6884. [Google Scholar]
Alleva, L.M.; Cai, C.; Clark, I.A. Using Complementary and alternative medicines to target the host response during severe influenza. Evid. Based Complement. Alternat. Med. 2010, 7, 501–510. [Google Scholar]
Kurokawa, M.; Watanabe, W.; Shimizu, T.; Sawamura, R.; Shiraki, K. Modulation of cytokine production by 7-hydroxycoumarin in vitro and its efficacy against influenza infection in mice. Antivir. Res. 2010, 85, 373–380. [Google Scholar]
Loginova, S.Y.; Borisevich, S.V.; Maksimov, V.A.; Bondarev, V.P. Toxicity estimation of unspecific medicinal antiviral agents for prophylaxis and therapy of hazard and especially hazard viral infections. Antibiot. Khimioter. 2009, 54, 3–4. [Google Scholar]
Tamiflu safety data sheet. Available online: http://www.drugbank.ca/system/msds/DB00198.pdf?1265922744/ (accessed on 11 November 2011).
Kolobukhina, L.V.; Merkulova, L.N.; Shchelkanov, M.Iu.; Burtseva, E.I.; Isaeva, E.I.; Malyshev, N.A.; L’vov, D.K. Efficacy of ingavirin in adults with influenza. Ter. Arkh. 2009, 81, 51–54, Russian. [Google Scholar]
© 2011 by the authors; licensee MDPI, Basel, Switzerland. This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative Commons Attribution license (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/).
0 notes
spiritual123 · 28 days ago
Text
Tumblr media
✨ Legătura dintre Arhanghelul Mihail și Crăciun
Mihail – Călăuza Inteligenței Cosmice Arhanghelul Mihail are rolul de a ghida omenirea spre evoluția spirituală 🌌. În perioada Crăciunului, când forțele materialiste sunt mai puternice, Mihail ajută sufletele umane să se conecteze la lumina divină și la impulsul cristic. 🌟
Crăciunul – Nașterea Luminii Interioare Crăciunul simbolizează victoria luminii asupra întunericului 🎄✨. Mihail inspiră sufletele să recunoască legătura cu Impulsul lui Hristos, născut în lume ca forță cosmică de iubire și lumină.
Mihail și Lupta Spirituală Mihail este apărătorul luminii împotriva forțelor lui Ahriman (materialism) și Lucifer (egoism exagerat). 🌠 În perioada Crăciunului, el sprijină oamenii să depășească obstacolele interioare și să își descopere legătura cu divinitatea.
Protectorul Luminii Cosmice Crăciunul este o perioadă când lumina cosmică coboară pe Pământ 🌍, iar Mihail are rolul de a proteja și de a transmite această lumină sufletelor umane, amintindu-le de originea lor spirituală. 🌟
Transformarea Interioară Prin ghidarea lui Mihail, oamenii pot experimenta o renaștere spirituală în perioada Crăciunului. 🎁 El inspiră fiecare suflet să-și descopere scopul divin și să treacă de la materialism la o viață spirituală mai profundă.
Rezumat:
🕊️ Arhanghelul Mihail este protectorul luminii spirituale, iar legătura sa cu Crăciunul se manifestă prin rolul său de a călăuzi omenirea spre lumină, iubire și transformare interioară în această perioadă sacră. 🌠 Crăciunul devine astfel o celebrare cosmică a luminii divine și a renașterii spirituale.
#RudolfSteiner #ArhanghelulMihail #Crăciun #Spiritualitate #Antroposofia
0 notes
intomylittleworld · 29 days ago
Text
MOMENTUL ÎN CARE ÎȚI DAI SEAMA CINE EȘTI....
"Cu oamenii cu care trebuie să mă supraveghez cînd vorbesc, mai bine nu vorbesc. Ne salutăm și ne dăm informații meteorologice.
Eu pot să număr pe degete prietenii pe care-i am, dar cu ei vorbesc ca și cum aș vorbi cu mine. Iar cu lumea, în general, ce rost are să vorbești daca nu spui ce gândești? În viață trebuie să înveți să citești printre rînduri și în oameni. Să citești printre vorbele lor și chiar dincolo de ele. Uneori, un oftat povestește mai mult decât decât un roman-fluviu, o privire -- mai mult decât o bibliotecă. Ce știm noi despre alții? Doar ce ne arată ei. În tăcerile lor nu putem pătrunde. Bănuiesc că fiecare poartă în suflet o cruce și câ fiecare este un rezumat al sufletului celorlalți. Nu-mi place să vorbesc tern, ca într-un raport. Totdeauna amestec gluma cu seriosul. Să știi că nu-mi bat joc niciodată de nimic și de nimeni. În viața mea nu mi-am bătut joc de nimeni și de nimic. Pentru mine, limba este ca o ființă cu care glumesc, mă joc, din care vreau să scot tot ce pot.
O parte din om se conjugă cu verbul "a avea", cealaltă pare că se conjugăcu verbul "a fi"; important este ca partea lui "a fi" să fie măcar egală cu cea a lui "a avea". Cei pentru care "a fi" atîrnă mai mult decât "a avea" sînt cei care trăiesc pentru a ști, pentru a afla, ceilalți sunt robii materiei, robii obiectelor. Orizontul lor este mărginit de obiecte ca de un parapet. Ei suferă de-o incurabilă orbie spirituală. Un lucru a reușit să facă Mama din mine și să fac eu din mine: un om care are-o mentalitate de om de cultură: respect pe cel care-o creează, respect pentru cel care-o răspândește, respect pe cel care-o respectă. De cînd e lumea și pămîntul, exista o categorie de oameni puși pe căpătuială, pentru care banul e mai presus de orice, e singura valoare-n care cred și căreia i se închină, pentru că banul e cel mai bun prieten, cel mai bun protector, n-are miros și deschide toate ușile. Și cum omul, spre deosebire de animale, mănîncă mai mult decât pentru a-și astîmpăra foamea, bea mai mult decât pentru a-și potoli setea, face amor nu numai pentru a-și reproduce specia, ucide cu premeditare fără să-și mănînce victima -- acumulează mai mult decât ar avea nevoie chiar pentru un trai îmbelșugat, e rapace pentru că acumularea îi dă senzația de siguranță și de superioritate asupra altuia. Asta dovedește cît de puțin evoluează mentalitatea oamenilor. Printre acești cumularzi de bunuri materiale sînt unii care au trecut prin război, prin bombardamente, prin cutremure, prin revoluție, prin tot ce-ți demonstrează că poți pierde totul într-o clipă, și n-au învățat nimic."
ILEANA VULPESCU (1932-2021)
0 notes
inprimalinie · 1 month ago
Text
SUA vor continua să conducă Uniunea Europeană
Vasili Koltașov, directorul Institutului pentru o nouă societate din Federația Rusă, a rezumat rezultatele anului 2024 într-un interviu acordat revistei International Affairs. Georgiana Arsene Potrivit expertului rus, anul 2024 s-a dovedit a fi foarte dificil pentru economia globală, pentru economiile occidentale. În primul rând, pentru că băncile centrale occidentale, menținându-și politica de…
0 notes
loredanaadrianam · 10 months ago
Text
Ce am citit în luna martie 2024
Dragilor, îmi mai fac și eu apariția pe aici din an în Paște, dar momentan chiar am destul timp la dispoziție din motiv de concediu medical, așa că m-am gândit să vă prezint în câteva cuvinte lecturile mele din martie. A fost o lună foarte bună și am reușit să citesc în toate cele trei medii disponibile: hârtie, digital și audio. Nu-mi fac un scop din asta, dar e foarte plăcut când îmi dau seama…
Tumblr media
View On WordPress
0 notes
bmhasdeu · 2 years ago
Text
Cărți despre cărți și cititori, biblioteci și bibliotecari
Tumblr media
View On WordPress
0 notes
valentin10 · 2 months ago
Text
REZUMAT | Oțelul Galați - CFR Cluj 0-1 | Etapa 6, SuperLiga, 2024 - 2025
youtube
View On WordPress
0 notes
laivinduroriginal · 1 month ago
Text
Cele mai Căutate Subiecte pe Google în 2024: Ce a atras atenția internațională?
Analizarea celor mai populare căutări pe Google din 2024 oferă o perspectivă fascinantă asupra evenimentelor, personalităților și fenomenelor care au captat atenția globală pe parcursul anului. Acest rezumat evidențiază nu doar cele mai căutate subiecte, ci și interesele și prioritățile societății. Cele mai populare căutări ale anului 2024 Copa AméricaCampionatul de fotbal a condus tendințele…
0 notes
drugastraian · 2 months ago
Text
Cauti jocuri de societate sau jucarii pentru copii ? - Avem jocuri puzzle , jocuri educative, jocuri interactive, jocuri societate - jucarii, jucarii copii, jucarii noriel, jucarii bebelusi, jucarii copii 2 ani, jucarii copii 1 an, jucarii cu j, jucarii jumbo, jucarii interactive, jucarii copii 3 ani, jucarii carrefour, jucarii auchan, jucarii antistres, jucarii auchan pitesti, jucarii angro, jucarii animale, jucarii altfel, jucarii altex, jucarii adolescenti, jucarii avatar, jucarii autism, auchan jucarii, animale domestice jucarii, asamblare jucarii la domiciliu pareri, altex jucarii, auchan jucarii baieti, asamblat jucarii la domiciliu, ansamblu depozitare jucarii, auchan jucarii plus, automate jucarii cu fise, antistres jucarii, "sc jucarii pentru tine srl, strada victoriei, pitești, argeş", animale jucarii, auchan jucării, auchan jucarii copii, animale jucarie, jucarii baieti, jucarii bebelusi 6 luni, jucarii bruder, jucarii bebe 1 an, jucarii baieti 5 ani, jucarii baieti 3 ani, jucarii bluey, jucarii bluey si bingo, jucarii bebe, bruder jucarii, bakugan jucarii, babyriki jucarii, bluey jucarii, bebe tei jucarii, blue si bingo jucarii, barbapapa jucarii, buticul cu jucarii, black friday jucarii, bebelusi jucarii, jucarii copii 4 ani, jucarii copii 5 ani, jucarii copii 6 ani, jucarii copii 1-2 ani, cartea cu jucarii, carrefour jucarii, cartea cu jucarii pdf, cartea cu jucarii rezumat, cutii depozitare jucarii, cartea cu jucarii rezumat pe capitole, cos depozitare jucarii, cartea cu jucarii de tudor arghezi, catalog jumbo jucarii, ce jucarii sunt la mcdonalds azi, jucarii de plus, jucarii din lemn, jucarii dentitie, jucarii din materiale reciclabile, jucarii de plus jumbo, jucarii de plus ieftine, jucarii de vis, jucarii de plus mari, jucarii dinozauri, jucarii de baie, depozitare jucarii, dinozauri jucarii, dulap jucarii, dulap jucarii ikea, doi frati au 121 respectiv 99 de jucarii, dedeman jucarii exterior, donatii jucarii bucuresti 2022, doctorita plusica jucarii, depozit jucarii, doi frati au impreuna 28 de jucarii, jucarii educative, jucarii emag, jucarii educative 1 an, jucarii elsa, jucarii educative 5 ani, jucarii educative 2 ani, jucarii educative 6 ani, jucarii educative 4 ani, jucarii exterior, jucarii en-gros, emag jucarii, emag jucarii baieti, emag jucarii fete, eroi in pijama jucarii, emag jucarii fete 10 ani, emag jucarii baieti 8 ani, elefant.ro jucarii, emag jucarii fete 6 ani, emag jucarii baieti 10 ani, emag jucarii baieti 5 ani, jucarii fete, jucarii fete 6 ani, jucarii fete 8 ani, jucarii fete 9-10 ani noriel, jucarii fete 5 ani, jucarii fete 3 ani, jucarii fete 9-10 ani, jucarii fete 4 ani, jucarii fete 7 ani, jucarii fisher price, fixiki jucarii, fisa de lectura cartea cu jucarii, fisher price jucarii, fragmente din cartea cu jucarii, fabrica de jucarii, familia barbapapa jucarii, ferma animalelor jucarii, furnizori jucarii ieftine, frozen jucarii, fabrica de jucarii romania, jucarii gonflabile, jucarii gabby's dollhouse, jucarii gradinita, jucarii gingivale, jucarii gasca zurli, jucarii gradina copii, jucarii grinch, jucarii garda felina, jucarii grimms, jucarii grizzy si lemingii, gradinita de copii plina e de jucarii, goose goose jucarii online, gasca de jucarii, gabby's dollhouse jucarii, gasca puisorilor jucarii, gradinita de copii plina e de jucarii poezie, grizzy si lemingii jucarii, ghicitori despre jucarii, gigantosaurus jucarii, gasca zurli jucarii, jucarii happy meal, jucarii harry potter, jucarii hamsteri, jucarii hello kitty, jucarii handmade, jucarii hola, jucarii hulk, jucarii huggy wuggy, jucarii ham miau, jucarii haba, happy meal jucarii, ham miau jucarii, harry potter jucarii, h&m jucarii, hello kitty jucarii, hg 74 jucarii, hape jucarii, huggie wuggie jucarii, hola jucarii, ham bebe jucarii, jucarii ieftine, jucarii ieftine copii, jucarii interactive 2 ani, jucarii interactive 3 ani, jucarii inteligente, jucarii interactive 1 an, jucarii interactive bebelusi 6 luni, jucarii interactive 1-2 ani, jucarii interactive noriel, ikea jucarii, ikea depozitare jucarii, ikea jucarii lem
https://www.dactylion.ro/jocuri-jucarii
0 notes
diagnozabam · 3 months ago
Text
Durata de viață a anvelopelor
Anvelopele sunt esențiale pentru siguranța unei mașini, iar întreținerea lor corectă este crucială pentru a preveni accidente și uzura prematură. Iată un rezumat al principalelor aspecte legate de schimbarea anvelopelor de vară și jantelor: 1. Durata de viață a anvelopelor de vară Kilometraj variabil: Durata de viață a anvelopelor de vară poate varia semnificativ în funcție de stilul de…
0 notes
consultatiiladomiciliu-ro · 4 months ago
Text
Acidul Uric si rezistenta la insulina cu Dr. Ben Bikman
Citeste articolul pe https://consultatiiladomiciliu.ro/acidul-uric-si-rezistenta-la-insulina-cu-dr-ben-bikman/
Acidul Uric si rezistenta la insulina cu Dr. Ben Bikman
Tumblr media
youtube
02:10 – Privire de ansamblu asupra acidului uric: Explicație despre ce este acidul uric și originile sale din metabolismul purinelor. 03:16 – Acid uric și hiperuricemie: Discuții despre producția de acid uric, excreția și starea de hiperuricemie. 05:09 – Cristalizarea gutei și acidului uric: Cât de ridicate niveluri de acid uric duc la gută și pietre la rinichi. 07:08 – Importanța acidului uric în metabolism: De ce este important acidul uric, relevanța sa clinică și legătura sa cu rezistența la insulină. 09:14 – Acidul uric și inflamația: Cum acidul uric provoacă inflamație sistemică și contribuie la rezistența la insulină. 12:27 – Surse de acid uric, purine și fructoză: defalcarea detaliată a metabolismului purinelor și fructozei care duce la producerea de acid uric. 16:31 – Metabolismul fructozei și acidul uric: Rolul ficatului în metabolizarea fructozei și legătura acesteia cu producția de acid uric. 22:47 – Intervenții farmacologice și nutriționale: Tratamente precum alopurinolul și beneficiile alulozei în reducerea acidului uric. 30:34 – Dieta ketogenă și acidul uric: Efectele dietei ketogenice asupra nivelului de acid uric și a sensibilității la insulină.
Rezumat:
În acest episod din The Metabolic Classroom, profesorul Bikman explorează semnificația acidului uric, în special impactul acestuia asupra rezistenței la insulină, un marker metabolic critic.
Începe prin definirea acidului uric ca un produs secundar al metabolismului purinelor, care de obicei este expulzat prin rinichi în urină. Cu toate acestea, atunci când producția de acid uric depășește excreția sa, acesta se acumulează în sânge, ducând la hiperuricemie. Această afecțiune poate determina cristalizarea acidului uric, adesea în articulații, rezultând gust. Acidul uric poate forma, de asemenea, pietre la rinichi și poate contribui la inflamație, care este legată de rezistența la insulină.
Dr. Bikman analizează biochimia purinelor și descompunerea lor în acid uric. El subliniază că acumularea excesivă de acid uric în sânge este dăunătoare, deoarece activează căi inflamatorii precum inflamazomul NLRP3. Această inflamație sistemică declanșează producția de ceramide, lipide care antagonizează direct semnalizarea insulinei, determinând rezistență la insulină. Prevalența rezistenței la insulină este o problemă de sănătate în creștere, legată de bolile cronice și exacerbată de niveluri ridicate de acid uric.
O parte semnificativă a prelegerii este dedicată relației dintre consumul de fructoză și producția de acid uric. Ben explică că ficatul metabolizează fructoza în acid uric printr-o serie de pași biochimici, ocolind mecanismele de reglare care limitează de obicei metabolismul glucozei. Acest metabolism nereglat al fructozei duce la o producție mare de acid uric, contribuind la acumularea acestuia în sânge. Creșterea consumului de fructoză, mai degrabă decât alimentele bogate în purine, cum ar fi carnea roșie și fructele de mare, este implicată în ratele în creștere ale gutei și problemelor metabolice legate de acidul uric.
În abordarea soluțiilor, dr. Bikman evidențiază intervenții farmacologice precum alopurinolul, care reduce nivelul de acid uric și îmbunătățește sănătatea metabolică, deși cu potențiale efecte secundare. De asemenea, el discută despre aluloză, un zahăr rar care arată promițător în scăderea acidului uric și îmbunătățirea rezultatelor metabolice. Cercetările preliminare sugerează că aluloza poate reduce nivelurile de acid uric prin îmbunătățirea excreției acestuia prin urină.
În plus, Ben se referă la dieta ketogenă, observând că, în ciuda potențialului creștere a nivelului de acid uric, aceasta reduce eficient inflamația și îmbunătățește sensibilitatea la insulină datorită efectelor antiinflamatorii ale cetonelor.
Dr. Bikman concluzionează subliniind importanța înțelegerii rolului acidului uric în sănătatea metabolică și a conexiunii sale cu rezistența la insulină. El încurajează cercetările suplimentare și intervențiile alimentare practice pentru a gestiona eficient nivelurile de acid uric. Prin integrarea abordărilor farmacologice, nutriționale și ale stilului de viață, indivizii pot atenua efectele adverse ale acidului uric ridicat și pot îmbunătăți sănătatea metabolică generală.
0 notes